利用简单重复序列间扩增(ISSR)分子标记对分布于我国浙江和山东的8个山茶种群共240个个体进行了遗传结构分析。结果表明:筛选出的20条引物扩增得到210条清晰条带,其中184条为多态性条带,多态位点百分率(PPB)为87.62％。经POPGENE1.32软件分析,山茶种群平均多态位点百分率(PPB)为68.99％,Nei’s基因多样性指数(HE)为0.256 9,Shannon信息指数(H)为0.377 9,种群遗传多样性较高。基因分化系数Gst = 0.182 9,表明遗传变异主要存在于种群内个体间。地理距离与遗传距离具有显著相关性(r =0. 856 7, P<0.05),岛屿地理隔离对山茶种群的遗传分化具有重要影响。UPGMA聚类表明:浙江5个山茶种群间的遗传相似度较高,山东青岛的植物园种群和五四广场种群可能移植自长门岩岛。我国野生山茶资源受人为破坏严重,建议在加强现有岛屿自然种群就地保护力度的同时,建立山茶种质资源库,促进基因交流。

目的 通过对花青素苷相关合成基因的表达水平和代谢产物的分析，系统地阐明‘金华美女’叶色变异与基因表达的关系。 方法 以‘金华美女’为材料，‘贝拉大玫瑰’、杜鹃红山茶和红山茶为参照组，使用NCBI Primer Designing Tool设计山茶DFR、ANS、LAR、ANR和UFGT基因的荧光定量引物，使用实时荧光定量PCR仪测定这5个基因在叶片4个发育时期的表达量；采用高效液相色谱仪测定对应时期的多酚合成途径的主要次生代谢产物（儿茶素、表儿茶素），以及花青素苷合成途径的主要代谢产物矢车菊素-3-O-葡萄糖苷的含量。 结果 表明：（1）在4个时期中，红叶品种叶片中DFR基因表达量与对照组差异不显著，ANS、LAR、ANR和UFGT基因在4个时期的表达量与对照组存在显著差异，这说明‘金华美女’类黄酮代谢途径相关基因在表达水平上发生了改变；（2）‘金华美女’叶片中多酚含量明显低于对照组，其中，表儿茶素含量仅为0.04~0.21 mg·g^-1，这说明在生理水平上，‘金华美女’叶片中多酚合成途径可能受阻；（3）‘金华美女’叶片中矢车菊素-3-O-葡萄糖苷含量达1.2~1.4 mg·g^-1，4个生长阶段均显著高于对照组，这说明‘金华美女’叶片具备持续合成花青素苷的能力。 结论 根据试验结果，推断‘金华美女’叶色变异的主要原因可能是由于花青素还原酶基因的表达水平受到了抑制，降低了矢车菊素催化成表儿茶素的效率，使叶片类黄酮代谢途径中以多酚为主的合成方向转向花青素苷合成方向。